Huidige Locatie: Home -  Hollister Belgium Online Shop het plasmide targeten chromosomale 5 AOX1locus

Hollister Belgium Online Shop het plasmide targeten chromosomale 5 AOX1locus

Hollister Belgium Online Shop

Ghilantens zijn een familie van cysteïnerijke remmers van de stolling enzym, factor Xa, die worden geproduceerd in de speekselklieren van de Zuid-Amerikaanse leechHaementeria ghilianii.In dit onderzoek een gen, die van de aminozuursequentie van een bepaald ghilanten isovorm, is samengesteld uit acht dubbelstrengs oligonucleotide fragmenten. Een gist expressieplasmide, pPIC9HG-2 werd geconstrueerd door Hollister Belgium Online Shop een in-frame fusie van het ghilanten coderende sequenties met het gebied dat codeert voor het pre-pro α-mating factor signaalsequentie voor uitscheiding. De expressie van ghilanten in pPIC9HG-2 is onder controle van de methanol induceerbare, alcohol oxidase (AOX1) promoter.Pichia pastorisyeast stammen KM 71 en SMD 1168 werden getransformeerd met gelineariseerde pPIC9HG-2 integratie van het plasmide targeten chromosomale 5 '-AOX1locus via homologe recombinatie. Beide stammen leverden His + transformanten die een sterke anticoagulerende activiteit in het medium. Productopbrengst werd verbeterd door gebufferde media (pH 6,0) aangevuld met ofwel casaminozuren of een mengsel van gistextract en pepton. De protease-deficiënte stam, SMD 1168, uitgescheiden over een tweeledige hoger niveau ofr-ghilanten dan KM 71. Significante klonale variatie in de expressie ofr-ghilanten werd gevonden onder de His + transformanten. Een hoog producerende kloon werd geselecteerd voor productie in de 2-liter schudkolf en 10 liter bioreactor scales.r-Ghilanten werd gewonnen uit de fermentatiebouillons Hollister Bodywarmer in één stap heparine Sepharose affiniteitschromatografie. Eiwit sequentie analyse van het amino-uiteinde bleek dat de correcte verwerking rijpe ghilanten gevarieerd met de fermentatie-omstandigheden verkregen.
0 Reacties


Spreek uw mening